2.3.4. Методи гістологічних досліджень
З метою з’ясування перебігу процесів, які в організмі стимульованих телиць відбуваються на гістологічному рівні, нами паралельно з проведенням досліду відбиралися яєчники від тварин ТОВ агрофірма “Косівщинська” та ВАТ “Племзавод, Михайлівка”, взимку, по 5 проб від усіх досліджуваних груп до і після обробки (всього від телиць голштінофризької та швіцької порід по10 проб). Контролем був матеріал, який відбирався за 2 доби до обробки (по 2 тварини від кожної групи). Для вивчення гістологічних змін у яєчниках після стимуляції, матеріал відбирали через 3 доби після введення препаратів (по 3 тварини від кожної групи).
Відбір матеріалу проводили від телиць в умовах Сумського м’ясокомбінату та безпосередньо в господарствах на забійних пунктах від щойно забитих тварин. Взірці проб від яєчників розміром 1,0х1,0х0,5 см фіксували в 10%-му нейтральному формаліні протягом 2-3 діб. Далі матеріал відмивали в проточній воді протягом 3-4 годин від залишків формаліну. Наступним етапом було зневоднення фіксованого матеріалу у спиртах зростаючої концентрації (40 – 60 – 80 – 96º). Далі зневоднені взірці ущільнювали рідким розчином парафіну з хлороформом при температурі 50ºС в термостаті протягом 12 годин, з наступним послідовним їх перенесенням у другу порцію рідкого, чистого парафіну. Після цього проводили заливку в блоки згідно загально прийнятій методиці. Зрізи (для світлової мікроскопії) товщиною 5-8 мкм виготовляли на санному мікротомі. Фарбування зрізів проводили гематоксиліном Ерліха - еозином і пікрофуксином за Ван-Гізоном. Після фарбування зрізи відмивали від залишків фарбника в дистильованій воді, зневоднювали етиловим спиртом висхідних концентрацій, просвітлювали ксилолом, потім заключали в тонкий шар канадського бальзаму між предметним та покривним скельцями. Готові препарати вивчалися методом мікроскопії. Під час мікроскопії проводили відбір препаратів із метою мікрофотографування. Фотографії виконувалися за допомогою фотомікронасадки кольоровою фотоплівкою, після чого отримані знімки за допомогою сканеру